親和柱原理
 

　　樣品經(jīng)提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有特殊抗體的免疫親和柱。此時，分析目標(biāo)物被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將目標(biāo)物從親和柱上洗脫下來。之后，用檢測儀器進(jìn)行定量檢測。
 

　　親和柱使用要點：
 

　　1、上柱的樣品溶液應(yīng)該保持酸堿中性、若偏酸或偏堿，可用PBS稀釋調(diào)節(jié)；
 

　　2、樣品添加回收試驗時，標(biāo)準(zhǔn)品添加到樣品中，靜置2小時后或過夜，再進(jìn)行樣品前處理，否則會出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。
 

　　3、親和柱樣品過柱洗脫速度要慢且均勻，約每秒1-2滴；
 

　　4、注意親和柱的柱容量，若超過柱容量，上柱前請稀釋；
 

　　5、如果將標(biāo)準(zhǔn)品直接過柱驗證回收率時，一定要確保標(biāo)準(zhǔn)上柱液中有機(jī)濃度不要超過25%，否則會影響柱子的吸附能力。
 

　　6、儲存條件為4℃-8℃。切記0℃以下的低溫，因為緩沖液凍結(jié)，會嚴(yán)重影響親和柱內(nèi)的物理結(jié)構(gòu)，對質(zhì)量影響很大，同時注意柱內(nèi)保護(hù)液面，若泄露導(dǎo)致瓊脂干燥萎，請勿使用；
 

　　7、試驗中使用的玻璃儀器等，一定要清洗干凈，尤其是用次氯酸等處理過的儀器，否則會使檢測結(jié)果偏低。